你有沒有經(jīng)歷過這樣的崩潰時(shí)刻？辛辛苦苦做的WB條帶突然消失，免疫熒光染色結(jié)果慘不忍睹，甚至復(fù)現(xiàn)師兄的實(shí)驗(yàn)卻得出南轅北轍的結(jié)果？這不是你的技術(shù)有問題，而是科研抗體的“通病”——特異性不足、重現(xiàn)性差，正在悄悄毀掉你的研究成果~
行業(yè)痛點(diǎn)：抗體市場的“隱形殺手”
在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，抗體是實(shí)驗(yàn)的“剛需工具”，卻也是公認(rèn)的“不確定因素”。據(jù)Baker M.(2016)《Nature》(doi:10.1038/533452a)統(tǒng)計(jì)，超70%的科研人員無法重復(fù)他人實(shí)驗(yàn)結(jié)果，過半人甚至無法復(fù)現(xiàn)自己的數(shù)據(jù)。這背后的罪魁禍?zhǔn)祝强贵w的兩大硬傷：特異性不足及批次差異大。 許多實(shí)驗(yàn)室被迫“賭運(yùn)氣”，用大量時(shí)間和經(jīng)費(fèi)試錯(cuò)，結(jié)果往往是“竹籃打水一場空”。
KO驗(yàn)證：抗體特異性的“照妖鏡”
目前接受度最廣且最受信任的抗體特異性驗(yàn)證方法是基因敲除(Knock-out, KO)驗(yàn)證。KO驗(yàn)證是抗體特異性驗(yàn)證的金標(biāo)準(zhǔn)。在一個(gè)敲除細(xì)胞株中，由于表達(dá)特定靶標(biāo)蛋白的基因被敲除，蛋白靶標(biāo)并不存在。如果抗體是特異的，在敲除細(xì)胞株中就不會檢測到結(jié)果，但在對照細(xì)胞株（或野生型細(xì)胞株）中就會檢測到特定的信號。與野生型相比，KO中的信號丟失是抗體特異性的最可靠證據(jù)，也說明抗體專一得“死心塌地”。
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| 類型 | 細(xì)胞系貨號 | 裂解液貨號 | 指標(biāo)名稱 | Uniprot | Gene ID |
| 優(yōu)質(zhì)KO細(xì)胞系推薦 | K004-4-4P | K004-4-4PL | EGFR | P00533 | 1956 |
| K024-1-4P | K024-1-4PL | Caspase-3 | P42574 | 836 | |
| 上新推薦 | K083-1-3P | K083-1-3PL | SLK | P06241 | 2534 |
| K086-1-2P | K086-1-2PL | Bcl-XL | Q07817 | 598 | |
| K087-1-1M | K087-1-1ML | RalA | P11233 | 5898 | |
| K088-1-3P | K088-1-3PL | Calreticulin | P27797 | 811 |
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科研人的“避坑指南”
抗體實(shí)驗(yàn)翻車并不可怕，可怕的是在錯(cuò)誤的道路上越走越遠(yuǎn)。選擇經(jīng)過KO/KD驗(yàn)證的高特異性抗體，就像給實(shí)驗(yàn)上了“雙保險(xiǎn)”——既節(jié)省時(shí)間成本，又提升成果可信度。科研無捷徑，但好的工具能讓努力事半功倍。告別“玄學(xué)實(shí)驗(yàn)”，從選擇可靠的抗體開始！
Caspase-3 Recombinant Rabbit mAb
WB｜Hela cell
細(xì)胞系貨號：K024-1-4P裂解液貨號：K024-1-4PL
EGFR Recombinant Rabbit mAb
ICC｜A549(left) cell and EGFR knockout A549(right) cell
細(xì)胞系貨號：K004-4-4P
EGFR Rabbit pAb
WB｜A549 cell
細(xì)胞系貨號：K004-4-4P
裂解液貨號：K004-4-4PL
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